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饲粮添加阴离子盐对山羊瘤胃发酵参数及血钙与其钙调因子水平的研究
发布日期:2018-09-13  来源:中国饲料   浏览次数:201
核心提示:本文已经被录用,近期即将在《中国饲料》刊登,未经同意,不得转载!
摘要:(目的)在课题组前期研究结果的基础上,试验通过添加阴离子盐研究低饲粮阴阳离子差(DCAD, mmol/kg DM)水平,研究其对山羊瘤胃发酵参数及防治低血钙(通过检测血钙与其钙调因子水平)的影响。(方法)试验采用交叉试验设计,将6只体况一致的山羊分为2组:对照组、处理组,每组3个重复,每个重复1只羊(n=6)。两组饲粮DCAD水平分别为157和-162。对照组饲喂对照饲粮,处理组在对照组基础上添加阴离子盐(MgSO4)降低DCAD水平。(结果)结果显示:两组山羊干物质采食量差异不显著(940.8 vs. 932.3,g/d,P>0.05)。添加阴离子盐可显著降低山羊尿液pH(6.4 vs. 7.8,P<0.05)。DCAD水平对瘤胃pH、氨肽氮浓度没有产生显著影响(6.80 vs. 6.48;6.24 vs. 6.46,mg/dL;P>0.05);2组瘤胃乙酸(11.60 vs. 15.90,mmol/L)、丙酸(2.69 vs. 3.48,mmol/L)、丁酸(2.18 vs. 2.83,mmol/L)、乙/丙(4.65:1 vs. 4.33:1)、总挥发性脂肪酸(18.11 vs. 24.38,mmol/L)差异不显著(P>0.05)。处理组血浆Ca2+(9.16 vs. 10.29,mg/dL)、VDR(49.16 vs. 57.62,ng/mL)、PTH(25.52 vs. 33.28,ng/L)与TRPV6(13.88 vs. 16.77,ng/mL)水平高于对照组,差异显著(P<0.05);两组山羊血浆1, 25-(OH)2VD3、CT浓度差异不显著(284.94 vs. 299.94,pg/dL;124.82 vs. 114.23,ng/L;P>0.05)。(结论)由此可见,低DCAD饲粮对适口性没有影响,可降低体内酸碱平衡状态,对瘤胃发酵参数指标没有负面影响,可提高血钙及其代谢因子水平,为生产实践推广添加阴离子盐提供了有益的支撑。
低血钙作为一种营养代谢性疾病,可诱发真胃移位、胎衣不下、乳房炎等疾病,是影响生产性能的核心疾病[1-3],是动物营养学界致力解决的重要科学课题。历经灌服水溶性钙盐、注射维生素D或其活性形式(1,25-(OH)2D3)、产前饲喂低钙日粮等处理方法后,Block[4]通过交叉试验,报道了降低日粮阴阳离子差(dietary cation-anion difference, DCAD)可增加Ca吸收,提高血Ca水平,防治低血钙,为该领域后续研究提供了基础[5-7]。
Ca的吸收包括3个步骤:首先,Ca2+经瞬时受体电位通道香草酸受体6(Transient receptor potential vanilloid receptor 6,TRPV6)介导顺浓度梯度扩散入胞;其次,入胞后Ca2+即与钙结合蛋白(Calcium binding protein D9k, CaBP-D9k)结合,并由细胞刷状缘膜顶膜转运至基底膜;最后,Ca2+在基底膜转运蛋白细胞膜钙泵(Plasma membrane Ca-ATPase 1b,PMCA1b)和钠钙交换体1(Na+/Ca2+ exchanger1,NCX1)的作用下,逆浓度梯度由基底膜跨膜出胞,进入血液[8]。上述3个步骤均受维生素D受体(VDR)的调控。
本课题组前期研究发现,Ca吸收相关蛋白表达水平的提高与增加血Ca浓度紧密相关[9-11]。血液是各种代谢物质在体内流动的场所,可反映组织蛋白表达含量。在本课题组已开展了不同DCAD水平对羊血CaBP-D9k[9]、VDR[11]含量和瘤胃体外发酵参数[12]的基础上,本试验重点研究低DCAD水平饲粮对血Ca稳恒及其调控因子水平与瘤胃内发酵参数的效应,为低DCAD防治低血钙和探讨山羊健康状况提供技术积累和基础数据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
采用交叉试验设计,以6只体况良好、年龄(3.5±0.2 y)、体重相近(42.6±2.1 kg)的黔北麻羊为试验动物,将其分为2组:处理组和对照组,每组3个重复,每个重复1只羊(n=6)。对照组饲喂基础日粮,由精料和羊草干草构成,设计DCAD(DCAD=Na+K-Cl-S, mmol/kg DM)水平为+150。根据文献报道和课题组前期研究结果,处理组在对照组日粮基础上添加阴离子盐MgSO4·7H2O,设计DCAD水平为-150。山羊日粮精粗比为40:60,组成及营养水平见表1。经测定,设计DCAD水平和实际测量值略有差异。
1.2 饲养管理
试验共持续47 d,前10 d为调整期,主要观察山羊采食和健康状况;后30 d为试验期,分为2期,用于交叉试验,每期15 d。每个试验期前10 d为预饲期,主要观察山羊采食MgSO4·7H2O的适应性,后5 d为采样期。每个试验期结束后,持续7 d采食对照饲粮,消除处理残留效应。试验期间羊舍保持干燥,自然通风,山羊单饲于代谢笼中,留有运动空间。日饲3次,饲喂时间分别为8:00、13:00、18:00。山羊自由采食及饮水。
1.3 指标检测
1.3.1 日粮常规养分与DCAD
自预饲期开始,每天采集饲粮样品,试验结束后混匀并制成分析试样,检测常规养分水平:粗蛋白质(Crude protein, CP)、中性洗涤纤维(Neutral detergent fiber, NDF)、酸性洗涤纤维(Acid detergent fiber, ADF)、粗灰分(Ash)、粗脂肪(Ether extract, EE)、钠(Na)、钾(K)、氯(Cl)、硫(S)。CP采用凯氏定氮法,NDF、ADF采用Van Soest法,EE采用乙醚浸提法,Ash采用灼烧法,氯(Cl)采用硝酸银滴定法(GB/T6439-92)测定,硫(S)含量采用硝酸镁法(GB/T17776-1999)测定[13],钠(Na)、钾(K)含量采用原子吸收法测定(试剂盒购自北京三雄科技公司)。DCAD计算公式:DCAD(mmol/kg)=Na(%)/0.0023 + K(%)/0.0039–Cl(%)/0.00355–S(%)/0.0016。
1.3.2 尿液pH
从每期正试期开始持续至试验结束,连续5 d,每天在采食2 h后用精密pH试纸(pH范围为5.4~7.0,6.4~8.0,上海试剂三厂)蘸取新鲜尿液与标准板比对,记录尿液pH,以此判定山羊尿液pH变化情况。
1.3.3 血液指标
晨饲前(7:00)从颈静脉采血10 mL于血液抗凝管中,3000 r/min离心15分钟,取上清血浆置于-20 ℃冰箱保存,试验结束后采用试剂盒法测定血浆Ca、甲状旁腺素(Parathyroid hormone, PTH)、降钙素(Calcitonin, CT)、1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2VD3)、瞬时性受体电位通道香草酸受体亚型6(transient receptor potential vanilloid 6, TRPV6)、维生素D受体(VDR)。上述指标检测试剂盒均购自南京建成生物公司。
作者:杨春红
 
 
 
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