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通过响应面优化微波辅助法提取芫荽根中花青素工艺研究
发布日期:2019-01-11  来源:中国调味品   浏览次数:157
核心提示:芫荽,别名胡荽、香菜、香荽。一般人都认为香菜根的功效与作用没有什么,经常丢弃香菜根,忽视香菜根的功效与作用,其实香菜根的功效与作用不仅有,而
 芫荽,别名胡荽、香菜、香荽。一般人都认为香菜根的功效与作用没有什么,经常丢弃香菜根,忽视香菜根的功效与作用,其实香菜根的功效与作用不仅有,而且香菜根的功效与作用还能够治疗很多疾病,香菜根的功效与作用表现为:去腥、健脾胃、治疗荨麻疹、促消化、促进血液循环、治乳痈初起、治感冒、治胃寒痛症等[1]。芫荽全株植物皆可食用,但一般日常只吃叶与茎,将根部丢弃,得不到充分人利用,主要原因是人们对芫荽根部的了解甚少。本实验不仅是对香菜的未来发展提供依据,对容易被忽略的根部的发展提供更多的证明。
近年来,随着对芫荽研究的深入,芫荽已提取出多种成分和研究其作用,研究发现,芫荽中花青素的含量高于柿叶与花生壳。目前,香菜中黄酮类化合物的提取研究不少,但香菜根中花青素的提取及含量测定研究不多[2]。本研究以芫菜根为原料,采用微波辅助提取芫荽根中花青素,利用响应面法(RSM)考察乙醇浓度、料液比、温度、时间等因素对芫荽根中花青素含量的影响,并确定最佳提取条件,以高效液相色谱(HPLC)测定其含量为验证。为进一步开发和利用香菜资源提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1仪器 高效液相色谱仪 LC-20AT 日本岛津公司;紫外-可见检测器 SPD-20A 日本岛津公司;超声波清洗机 TP150 天鹏电子新技术(北京)有限公司;真空泵(无油) GM-0.33II 天津市津腾实验设备有限公司;电子分析天平 MEL-204E 梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;溶剂过滤器 1000 mL 天津市津腾实验设备有限公司;多功能食品粉碎机HL-28 上海海菱电器有限公司;微波提取器WTS03-1南京杰全设备公司。
1.1.2试剂 甲醇、甲酸 HPLC 级 国药(集团)化学试剂有限公司;乙醇 分析纯;水 纯净水 杭州娃哈哈集团;芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所。
1.2 试验方法
1.2.1 原材料的处理 新鲜香菜购于农贸市场,将芫荽根剪下,用流水清洗并凉干,放入烘箱中烘干至恒重,粉碎磨粉过筛(60目),将芫荽根样品放入磨口广口瓶中,置于干燥器里保存,备用。
1.2.2 原材料中黄酮类化合物的提取 称取100g芫荽根粉,置于微波萃取器中,在50 ℃时,按1:20的料液比加入60%乙醇溶剂,通电,微波萃取25 min,取出,冷却室温后,取澄清滤液,用 0.45µm针筒式滤膜,过滤器过滤,滤液于 100 mL 容量瓶中,备用[2]。
1.2.3对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的芦丁标准品10 mg,置于100 mL 容量瓶中,用无水乙醇定容,配成0.1 mg / mL的芦丁对照品溶液,摇匀,取澄清滤液,用 0.45µm 针筒式滤膜,过滤器过滤,滤液于 10 mL 容量瓶中,备用。
1.2.4色谱条件 色谱柱:Shmadzu Shim-pack-vp-ODS(150 mm×4.6 mm,5 µm);柱温:室温;流动相:甲醇(0.02mol/L )-甲酸(95:5),流速:1.0 mL/min;进样量:10 μL。
1.2.5 流动相的选择 在色谱条件的优化中,在流动相的选择上,分别考察了甲醇-水、甲醇-甲酸两种流动相。经过试验:甲醇-甲酸按体积比为95:5作为流动相,峰形最理想。流动相中,甲酸的加入,使花青素在流动相中的电离减弱,从而减少了峰的拖尾可以改善分离度和减少了峰的拖尾,并提早出峰时间,但对保持柱的稳定性和延长柱的寿命有一定的影响[3-4]。
1.2.6 标准曲线的绘制 准确移取0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL芦丁标准液于10 mL 容量瓶中,用流动相稀释至刻度,进行HPLC分析。以峰面积为横坐标,芦丁含量为纵坐标给图,制得标准曲线,计算出标准曲线的回归方程为: A=1.598×107C +1.168×104,R2=0.9998。如图1所示。结果表明,该方法分离效果良好,质量浓度在0.01~0.047 mg/mL 时与峰面积呈良好的线性关系。
 
 
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